Προϊόντα

Η κυτταρική παροχή τριφωσφορικών δεοξυνουκλεοσιδίων (dNTPs) είναι ζωτικής σημασίας για την αντιγραφή και την επιδιόρθωση του DNA.Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε τον ρόλο της CMP/UMP κινάσης (CMPK), ενός ενζύμου που καταλύει το σχηματισμό CDP, στην επιδιόρθωση του DNA.Η καταστροφή της CMPK καθυστερεί την επιδιόρθωση του DNA κατά την ανάκαμψη από τη βλάβη από την υπεριώδη ακτινοβολία σε κύτταρα που στερούνται ορού αλλά όχι στα κύτταρα χωρίς στέρηση ορού.Η εξωγενής παροχή κυτιδίνης ή δεοξυκυτιδίνης διευκολύνει την επιδιόρθωση του DNA που εξαρτάται από το CMPK σε κύτταρα που στερούνται ορού, υποδηλώνοντας ότι η σύνθεση dCDP ή CDP καθορίζει τον ρυθμό επιδιόρθωσης.Ωστόσο, το knockdown CMPK δεν επηρεάζει το επίπεδο σταθερής κατάστασης του dCTP σε κύτταρα που στερούνται ορού.Στη συνέχεια βρήκαμε τον εντοπισμό της CMPK σε θέσεις βλάβης του DNA και το σχηματισμό συμπλόκου της με Tip60 και αναγωγάση ριβονουκλεοτιδίου.Η ανάλυσή μας έδειξε ότι το Ν-τερματικό 32-αμινοξύ του CMPK απαιτείται για την πρόσληψή του σε θέσεις βλάβης του DNA με τρόπο που εξαρτάται από το Tip60.Η επανέκφραση της CMPK άγριου τύπου αλλά όχι διαγραμμένης από το Ν-άκρο αποκαθιστά την αποτελεσματικότητα της επιδιόρθωσης του DNA σε κύτταρα κλονισμού CMPK.Προτείναμε ότι ο ειδικός στη θέση σχηματισμός dCDP μέσω CMPK παρέχει ένα μέσο για τη διευκόλυνση της επιδιόρθωσης του DNA σε κύτταρα που στερούνται ορού.