Προϊόντα

Η παρούσα μελέτη περιγράφει μια απλή και αποτελεσματική μέθοδο που χρησιμοποιεί υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) σε συνδυασμό με ανίχνευση φθορισμού για τον προσδιορισμό των κινητικών παραμέτρων της πρόσληψης γλουταμικού στον νευρικό ιστό.Ο αμφιβληστροειδής ιστός που λήφθηκε από νεοσσούς 7 ημερών επωάστηκε με γνωστές συγκεντρώσεις γλουταμικού (50-2000 μΜ) για 10 λεπτά και μετρήθηκαν τα επίπεδα του παραγόμενου από ο-φθαλδεΰδη (OPA) νευροδιαβιβαστή στο μέσο επώασης.Με την αξιολόγηση της διαφοράς μεταξύ αρχικής και τελικής συγκέντρωσης γλουταμικού στο μέσο, ​​χαρακτηρίστηκε ένας κορεσμένος μηχανισμός πρόσληψης (Κ(m)=8,2 και V(max)=9,8 nmol/mg πρωτεΐνης/λεπτό).Αυτό το μέτρο ήταν σε μεγάλο βαθμό εξαρτώμενο από το νάτριο και τη θερμοκρασία, υποστηρίζοντας σθεναρά ότι ο μηχανισμός για τις μειώσεις της συγκέντρωσης όντως προσλαμβάνεται από μεταφορείς υψηλής συγγένειας.Επιπλέον, τα αποτελέσματά μας κατέδειξαν επίσης ότι ο χλωριούχος ψευδάργυρος (ένας αναστολέας μεταφορέων γλουταμικού/ασπαρτικού) προκάλεσε μια εξαρτώμενη από τη συγκέντρωση μείωση στην πρόσληψη γλουταμικού te, αποδεικνύοντας την ειδικότητα της μεθοδολογίας μας.Συνολικά, η παρούσα εργασία χαρακτηρίζει μια εναλλακτική μεθοδολογία για την αξιολόγηση της πρόσληψης γλουταμικού στον νευρικό ιστό χρησιμοποιώντας HPLC.Αυτή η προσέγγιση θα μπορούσε να είναι ένα σημαντικό εργαλείο για μελέτες που σχετίζονται με τον χαρακτηρισμό μικρών αλλαγών στη μεταφορά γλουταμικού που σχετίζονται με τραυματισμό του κεντρικού νευρικού συστήματος.