Προϊόντα

Αναπτύξαμε ένα νέο σύστημα χορήγησης μικρού παρεμβαλλόμενου RNA (siRNA) χρησιμοποιώντας ένα τριμερές σύμπλοκο με πολυαιθυλενοϊμίνη (PEI) και γ-πολυγλουταμικό οξύ (γ-PGA), το οποίο έδειξε σιγαστικό αποτέλεσμα και καμία κυτταροτοξικότητα.Τα δυαδικά σύμπλοκα του siRNA με PEI ήταν περίπου 73-102 nm σε μέγεθος σωματιδίων και 45-52 mV στο ζ-δυναμικό.Η επίδραση σιγής των συμπλοκών siRNA/PEI αυξήθηκε με την αύξηση του PEI και τα σύμπλοκα siRNA/PEI με αναλογία φορτίου μεγαλύτερη από 16 έδειξαν σημαντική μείωση της λουσιφεράσης σε κυτταρική σειρά καρκινώματος παχέος εντέρου ποντικού που εκφράζει τακτικά λουσιφεράση (κύτταρα Colon26/Luc).Ωστόσο, ισχυρή κυτταροτοξικότητα και συγκόλληση αίματος παρατηρήθηκαν στο σύμπλεγμα siRNA/Lipofectamine και στο σύμπλεγμα siRNA/PEI16.Η επαναφόρτιση κατιονικών συμπλοκών με μια ανιονική ένωση αναφέρθηκε ότι είναι μια πολλά υποσχόμενη μέθοδος για την αντιμετώπιση αυτών των τοξικοτήτων.Ως εκ τούτου, παρασκευάσαμε τριμερή σύμπλοκα siRNA με PEI (αναλογία φορτίου 16) με την προσθήκη γ-PGA για τη μείωση της κυτταροτοξικότητας και την παροχή siRNA.Όπως ήταν αναμενόμενο, η κυτταροτοξικότητα των τριμερών συμπλεγμάτων μειώθηκε με αύξηση της περιεκτικότητας σε γ-PGA, η οποία μείωσε το ζ-δυναμικό των συμπλόκων.Ένα ισχυρό αποτέλεσμα σιγής συγκρίσιμο με το σύμπλοκο siRNA/Lipofectamine ανακαλύφθηκε σε τριμερή σύμπλοκα συμπεριλαμβανομένου του γ-PGA με ανιονικό επιφανειακό φορτίο.Η υψηλή ενσωμάτωση τριμερών συμπλοκών σε κύτταρα Colon26/Luc επιβεβαιώθηκε με μικροαντίγραφο φθορισμού.Έχοντας επιτύχει την καταστροφή ενός εξωγενώς επιμολυσμένου γονιδίου, η ικανότητα του συμπλόκου να μεσολαβεί στην καταστροφή ενός ενδογενούς γονιδίου οικιακής φροντίδας, της αφυδρογονάσης της 3-φωσφορικής γλυκεραλδεΰδης (GAPDH), αξιολογήθηκε σε κύτταρα Β16-F10.Το τριμερές σύμπλοκο (σύμπλεγμα siRNA/PEI16/γ-PGA12) εμφάνισε ένα σημαντικό αποτέλεσμα καταστροφής GAPDH.Έτσι, αναπτύξαμε ένα χρήσιμο σύστημα παροχής siRNA.