Προϊόντα

Ερωτήματα έχουν τεθεί συχνά πρόσφατα: 1. Γιατί μπορεί να χρησιμοποιηθεί η δοκιμή ONPG για τη διάκριση της καθυστερημένης ζύμωσης λακτόζης;2. Γιατί το εθνικό πρότυπο αναφέρει ότι είναι απαραίτητη η χρήση τρισακχαρίτη σιδήρου χλωριούχου νατρίου 3% (ή τρισακχαρίτης σιδήρου) για τη δοκιμή ONPG;3. Για το Vibrio parahaemolyticus, κατά τη διεξαγωγή της δοκιμής OPNG, γιατί πρέπει να προστίθεται τολουόλιο στάγδην σύμφωνα με το πρότυπο;Ποια είναι η λειτουργία;

Η εταιρεία μας εξέτασε πολλές πληροφορίες, τις συνόψισε και τις μοιράστηκε μαζί σας παρακάτω:

Αρχή: Η κινεζική ονομασία του ONPG είναι ο-νιτροβενζολο-β-D-γαλακτοπυρανοσίδη.Το ONPG μπορεί να υδρολυθεί σε γαλακτόζη και κίτρινη ο-νιτροφαινόλη (ΟΝΡ) από τη β-γαλακτοσιδάση, επομένως η δραστηριότητα της β-γαλακτοσιδάσης μπορεί να ανιχνευθεί από την αλλαγή χρώματος του μέσου καλλιέργειας.

Η λακτόζη είναι ένα σάκχαρο που πρέπει να ανιχνεύσουν οι περισσότεροι μικροοργανισμοί.Ο μεταβολισμός του απαιτεί δύο ένζυμα, το ένα είναι η κυτταρική περμεάση, η λακτόζη εισέρχεται στα κύτταρα υπό τη δράση της περμεάσης.η άλλη είναι η β-γαλακτοσιδάση, η οποία υδρολύει τη λακτόζη σε γαλακτόζη.Λακτόζη και γλυκόζη.Η β-γαλακτοσιδάση μπορεί επίσης να δράσει απευθείας στο ONPG για να το υδρολύσει σε γαλακτόζη και κίτρινη ο-νιτροφαινόλη (ΟΝΡ).Μπορεί να γίνει σε 24 ώρες, ακόμη και με ζυμωτήρες καθυστερημένης λακτόζης.Επομένως, εξηγεί τα αποτελέσματα παρατήρησης της συλλογής της καλλιέργειας 1 από την κλίση του άγαρ και του εμβολιασμού της σε πλήρη κύκλο στους 36°C για 1-3 ώρες και 24 ώρες.Εάν παράγεται β-γαλακτοσιδάση, θα γίνει κίτρινη σε 1-3 ώρες, εάν δεν υπάρχει τέτοιο ένζυμο, δεν θα αλλάξει χρώμα σε 24 ώρες.

Σύμφωνα με τα δύο παραπάνω ένζυμα, οι μικροοργανισμοί μπορούν να χωριστούν στις ακόλουθες κατηγορίες:

1 βακτήριο ζύμωσης λακτόζης (18-24 ώρες) με περμεάση και β-γαλακτοσιδάση P + G +;

2 Καθυστερημένοι ζυμωτήρες λακτόζης (που χρειάζονται περισσότερο από 24 ώρες) που στερούνται περμεάσης αλλά διαθέτουν γαλακτοσιδάση: P-G+.

3 Ζυμωτήρες μη λακτόζης που στερούνται τόσο περμεάσης όσο και γαλακτοσιδάσης: P-G-.

Η δοκιμή ONPG μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διάκριση των βακτηρίων που προκαλούν καθυστέρηση στη λακτόζη (P-G+) από τα βακτήρια λακτόζης που δεν ζυμώνονται (PG-), όπως:

1 Διαφοροποιήστε τους ζυμωτές όψιμης λακτόζης (P-G+) από τους ζυμωτές μη λακτόζης (P-G-).

(α) Citrobacter (+) και Salmonella arizonae (+) από Salmonella (-).

(β) Escherichia coli (+) από Shigella sonnei (-).

Γιατί πραγματοποιήθηκε ο προσδιορισμός ONPG χρησιμοποιώντας ολονύκτια καλλιέργεια σε τρισακχαρίτη σιδήρου χλωριούχου νατρίου 3% (τρισακχαρίτης σιδήρου);Η εταιρεία μας έχει συμβουλευτεί πολλές πληροφορίες, αλλά δεν υπάρχει σαφής δήλωση.Μόνο στον ιστότοπο του FDA, γράφεται ότι "Εμβολιάστε καλλιέργειες προς δοκιμή σε κεκλιμένες πλάκες τριπλού σιδήρου σακχάρου και επωάστε για 18 ώρες στους 37°C (ή άλλη κατάλληλη θερμοκρασία, εάν απαιτείται). % λακτόζη μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί."σημαίνει: τα βακτήρια δοκιμής εμβολιάστηκαν στο μέσο τρισακχαρίτη σιδήρου και καλλιεργήθηκαν στους 37°C για 18 ώρες.Είναι επίσης αποδεκτές οι πλάκες θρεπτικού άγαρ (ή άλλο) μέσο που περιέχει 1% λακτόζη.Επομένως, συμπεραίνεται ότι το τρισακχαριδικό μέσο σιδήρου περιέχει λακτόζη.Μετά από ολονύκτια ανάπτυξη, τα βακτήρια έχουν παράγει μια καλή ενεργή β-γαλακτοσιδάση.Χρησιμοποιώντας τέτοια βακτήρια, το ONPG μπορεί να αποσυντεθεί από τη β-γαλακτοσιδάση πιο γρήγορα.Το πειραματικό φαινόμενο εκδηλώνεται ταχύτερα και καλύτερα.Επιπλέον, η στάγδην προσθήκη τολουολίου και ένα λουτρό νερού για 5 λεπτά είναι όλα προκειμένου να απελευθερωθεί πλήρως η β-γαλακτοσιδάση.