Προϊόντα

Ενεργοποιητές καρβονικής ανυδράσης: η πρώτη μελέτη ενεργοποίησης της ανθρώπινης εκκριτικής ισομορφής VI με αμινοξέα και αμίνες.

Το εκκριτικό ισοένζυμο της ανθρώπινης καρβονικής ανυδράσης (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, έχει κλωνοποιηθεί, εκφραστεί και καθαριστεί σε ένα βακτηριακό σύστημα έκφρασης.Οι κινητικές παράμετροι για την αντίδραση ενυδάτωσης CO(2) απέδειξαν ότι το hCA VI έχει ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) και k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (σε pH 7,5 και 20 βαθμούς C).Το hCA VI έχει σημαντική καταλυτική δράση για τη φυσιολογική αντίδραση, της ίδιας τάξης μεγέθους με την πανταχού παρούσα ισομορφή CA I ή το διαμεμβρανικό, σχετιζόμενο με όγκο ισοένζυμο CA IX.Μια σειρά αμινοξέων και αμινών αποδείχθηκε ότι δρουν ως ενεργοποιητές CA VI, με μεταβλητή αποτελεσματικότητα.Τα l-His, l-Trp και ντοπαμίνη έδειξαν ασθενή αποτελέσματα ενεργοποίησης CA VI (K(A)s στην περιοχή από 21-42 microM), ενώ τα d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, σεροτονίνη και μερικές πυριδυλ-αλκυλαμίνες ήταν καλύτεροι ενεργοποιητές, με Κ(Α) στην περιοχή από 13-19 μΜ.Οι καλύτεροι ενεργοποιητές CA VI ήταν l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-αμινο-l-Phe και ισταμίνη, με Κ(Α) στην περιοχή από 1,23-9,31 μΜ.Όλοι αυτοί οι ενεργοποιητές ενισχύουν το k(cat), που δεν έχουν καμία επίδραση στο K(M), συμμετέχοντας έτσι στο βήμα καθορισμού του ρυθμού στον καταλυτικό κύκλο, τις αντιδράσεις μεταφοράς πρωτονίων μεταξύ της ενεργής θέσης του ενζύμου και του περιβάλλοντος.