L-Methionine Cas: 63-68-3 99% Λευκή κρυσταλλική σκόνη
| Αριθμός καταλόγου | XD90287 |
| Ονομασία προϊόντος | L-Μεθειονίνη |
| CAS | 63-68-3 |
| Μοριακός τύπος | C5H11NO2S |
| Μοριακό βάρος | 149,21134 |
| Στοιχεία αποθήκευσης | Περιβάλλων |
| Εναρμονισμένος Δασμολογικός Κώδικας | 29304010 |
Προσδιορισμός προϊόντος
| Χημική δοκιμή | 98% - 101,5% |
| Εμφάνιση | Λευκοί κρύσταλλοι ή κρυσταλλική σκόνη |
| συμπέρασμα | |
| Ταυτοποίηση | Πληροί την απαίτηση |
| pH | 5,6 - 6,1 |
| Απώλεια στο στέγνωμα | ≤ 0,3% |
| Θειικό (SO4) | ≤ 0,03% |
| Σίδερο | ≤ 0,003% |
| Υπολείμματα κατά την ανάφλεξη | ≤ 0,4% |
| Χλωριούχο | ≤ 0,05% |
| Βαρέων μετάλλων | ≤ 0,0015% |
| Χρωμογραφική Καθαρότητα | Δεν βρίσκεται περισσότερο από το 2,0% των συνολικών ακαθαρσιών |
| Ειδική περιστροφή [ α ] D 2 5 | +22,4º ~ +24,7º |
Οι προηγούμενες μελέτες μας έχουν αποκαλύψει τους κρίσιμους ρόλους του τόσο στα πρώιμα όσο και στα τελευταία στάδια της λοίμωξης από KSHV.Σε αυτή τη μελέτη, ερευνήσαμε την αλληλεπίδραση του ORF45 χρησιμοποιώντας μια ομάδα μονοκλωνικών αντισωμάτων.Εκτός από τις προηγουμένως αναγνωρισμένες εξωκυττάρια ρυθμιζόμενες πρωτεΐνες κινάσης (ERK) και ρ90 ριβοσωμικής κινάσης S6 (RSK), βρήκαμε αρκετές άλλες συνκαθαρισμένες πρωτεΐνες, συμπεριλαμβανομένων εξέχουσες των ~38 kDa και ~130 kDa.Η φασματομετρία μάζας αποκάλυψε ότι η πρωτεΐνη των 38 kDa είναι ιική ORF33 και η πρωτεΐνη των 130 kDa είναι η κυτταρική USP7 (ειδική για την ουβικιτίνη πρωτεάση 7).Χαρτογραφήσαμε την περιοχή δέσμευσης ORF33 με τα εξαιρετικά διατηρημένα καρβοξυτελικά 19 αμινοξέα (aa) του ORF45 και την περιοχή δέσμευσης USP7 στο αναφερόμενο συναινετικό μοτίβο στην κεντρική περιοχή του ORF45.Χρησιμοποιώντας χρώση με ανοσοφθορισμό, παρατηρήσαμε εντοπισμό του ORF45 με ORF33 ή USP7 τόσο υπό επιμολυσμένες συνθήκες όσο και σε κύτταρα μολυσμένα με KSHV.Επιπλέον, παρατηρήσαμε επανατοποθέτηση εξαρτώμενου από το ORF45 ενός τμήματος του ORF33/USP7 από τον πυρήνα στο κυτταρόπλασμα.Βρήκαμε ότι το ORF45 προκάλεσε μια αύξηση στη συσσώρευση πρωτεΐνης ORF33 που καταργήθηκε εάν διαγραφόταν είτε ο τομέας δέσμευσης ORF33 είτε USP7 στο ORF45.Επιπλέον, η διαγραφή του διατηρημένου καρβοξυλικού άκρου του ORF45 στο γονιδίωμα του KSHV μείωσε δραστικά το επίπεδο της πρωτεΐνης ORF33 σε κύτταρα μολυσμένα με KSHV και κατήργησε την παραγωγή ιοσωμάτων απογόνων.Συλλογικά, τα αποτελέσματά μας όχι μόνο αποκαλύπτουν νέα συστατικά της αλληλεπίδρασης ORF45, αλλά καταδεικνύουν επίσης ότι οι αλληλεπιδράσεις μεταξύ αυτών των πρωτεϊνών είναι κρίσιμες για τη λυτική αντιγραφή του KSHV. Ο ερπητοϊός που σχετίζεται με το σάρκωμα Kaposi (KSHV) είναι ο αιτιολογικός παράγοντας αρκετών ανθρώπινων καρκίνων.Το KSHV ORF45 είναι μια πολυλειτουργική πρωτεΐνη που απαιτείται για τη λυτική αντιγραφή του KSHV, αλλά οι ακριβείς μηχανισμοί με τους οποίους το ORF45 εκτελεί τις κρίσιμες λειτουργίες του είναι ασαφείς.Οι προηγούμενες μελέτες μας αποκάλυψαν ότι όλη η πρωτεΐνη ORF45 στα κύτταρα υπάρχει σε σύμπλοκα υψηλού μοριακού βάρους.Ως εκ τούτου, επιδιώξαμε να χαρακτηρίσουμε την αλληλεπίδραση του ORF45 για να παρέχουμε πληροφορίες για τους ρόλους του κατά τη διάρκεια της λυτικής αντιγραφής.Χρησιμοποιώντας μια ομάδα μονοκλωνικών αντισωμάτων, ερευνήσαμε την αλληλεπίδραση του ORF45 σε κύτταρα μολυσμένα με KSHV.Εντοπίσαμε δύο νέους συνεργάτες δέσμευσης του ORF45: την ιική πρωτεΐνη ORF33 και την κυτταρική ειδική για την ουβικιτίνη πρωτεάση 7 (USP7).Αποδεικνύουμε περαιτέρω ότι η αλληλεπίδραση μεταξύ ORF45 και ORF33 είναι κρίσιμη για την αποτελεσματική παραγωγή ιικών σωματιδίων KSHV, υποδηλώνοντας ότι η στοχευμένη παρέμβαση σε αυτήν την αλληλεπίδραση μπορεί να αντιπροσωπεύει μια νέα στρατηγική για την αναστολή της λυτικής αντιγραφής του KSHV.
