Προϊόντα

Το CTP: φωσφοχολινο κυτιδυλυλοτρανσφεράση α (CCTa) είναι ένα πυρηνικό ένζυμο που καταλύει το στάδιο περιορισμού του ρυθμού στην οδό CDP-χολίνης για τη σύνθεση φωσφατιδυλοχολίνης (PC).Η λιπιδική ενεργοποίηση του CCTα έχει ως αποτέλεσμα τη μετατόπισή του στο πυρηνικό περίβλημα και την επέκταση ενός δικτύου ενδοπυρηνικής μεμβράνης που ονομάζεται πυρηνοπλασματικό δίκτυο (NR) μέσω ενός μηχανισμού που περιλαμβάνει παραμόρφωση μεμβράνης.Τα πυρηνικά ελάσματα απαιτούνται επίσης για τη σταθερότητα και τον πολλαπλασιασμό του NR, αλλά δεν είναι γνωστό εάν αυτή η μοναδική δομή ή το πυρηνικό έλασμα γενικά απαιτείται για τη σύνθεση PC.Για να εξεταστεί αυτή η σχέση, το πυρηνικό έλασμα εξαντλήθηκε από RNAi ή διαταράχθηκε από την έκφραση του συνδρόμου Hutchinson-Gilford progeria (HGPS) μεταλλαγμένης λαμίνης Α (προγερίνη) και αναλύθηκε η επίδραση στον μεταβολισμό CCTα και χολίνης.Η διαμεσολαβούμενη από siRNA σίγαση της λαμίνης A/C ή της λαμίνης Β1 σε κύτταρα CHO για τη μείωση του NR δεν είχε καμία επίδραση στη σύνθεση του PC, ενώ η διπλή καταστροφή ανέστειλε μη ειδικά την οδό.Επιβεβαιώνοντας τον δευτερεύοντα ρόλο του στη σύνθεση του PC, μόνο το 10% της παροδικά υπερεκφρασμένης φωσφοτρανσφεράσης χολίνης/αιθανολαμίνης ανιχνεύθηκε στο NR.Στα κύτταρα CHO, το CCTα ήταν πυρηνοπλασματικό και ταυτοποιήθηκε με GFP-προγερίνη σε πυρηνικές πτυχές και κολπώσεις.Ωστόσο, οι ινοβλάστες HGPS εμφάνισαν μια ανώμαλη κατανομή του CCTα στο κυτταρόπλασμα και στο πυρηνικό περίβλημα που συνοδεύτηκε από 2 φορές μείωση της σύνθεσης του PC.Παρά τον αλλοιωμένο εντοπισμό του, τα πειράματα επισήμανσης χολίνης έδειξαν ότι η δραστηριότητα CCT δεν επηρεάστηκε και η αναστολή της σύνθεσης PC εντοπίστηκε στη μειωμένη δραστηριότητα ενός ευαίσθητου στο ημιχολίνιο μεταφορέα χολίνης.Συμπεραίνουμε ότι το CCTα και οι λαμίνες συνεργάζονται ειδικά για να σχηματίσουν το NR, αλλά η συνολική δομή του πυρηνικού περιβλήματος έχει ελάχιστο αντίκτυπο στη δραστηριότητα του CCT και στη σύνθεση του PC.